对于悬浮细胞：离心收集细胞，以2×106细胞为例，在样本中加入100μL的含1%PMSF的1×PBS缓冲液，震荡混匀细胞，4℃或冰上裂解30min。08对于组织匀浆、组织全蛋白、细胞提取液等蛋白提取样
果纳芬不要求冷藏，在零下3度冬天的室内温度也是比较适合果纳芬储存的，因为果纳芬只要储存在2到25度的环境中就可以。不过需要注意的是，要放在阴凉干燥的地方，避免被阳光直射。而放在冰箱冷藏的季节大多是在夏天，夏天温度过高会使药物内的蛋白质分解，从而产生出对人体有害的物质，而冬天的室内是可以常温储存的。
果纳芬是一种比较常规的促排药物，一般适用于卵巢功能不是很好的女性。而果纳芬注射时间和存储时间一定要严格按照医嘱来进行。下面是果纳芬的具体储藏要求：
1.未开封的果纳芬注射笔需要在2-8℃的温度冷藏，不能冷冻保存，冷冻后药物是不能使用的；
2.开封后的果纳芬注射笔需要在25℃以下避光保存，开封后最多能够放28天，超过28天就要丢弃，不可以继续使用；
3.正常的果纳芬注射笔内的药液澄清透明，若出现浑浊、沉淀就不能使用。
ELISA样本制备指南及注意事项
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定义及介绍
ELISA（enzyme linked immunosorbent assay，酶联免疫吸附测定）是最基础的免疫学实验之一，其理论基础是抗原抗体的特异性反应。ELISA因其特异性强、灵敏度高、稳定性好而被广泛使用。ELISA试剂盒检测样品包括血清、血浆、细胞培养上清、灌洗液或尿液等生物样本，实验操作步骤并不繁琐，但实验完成后需要把样本检测结果OD值转化为浓度值，从而供下一步分析所用，因此样品的预处理对于后续数据处理和结果分析非常重要。
样本制备指南
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血清
全血样品于室温放置2小时或2-8℃过夜后于2-8℃，1000×g离心20min，取上清即可检测。收集血液的试管应为一次性的无内毒素试管。避免使用溶血，高血脂样品
2.血浆
抗凝剂推荐使用EDTA-Na
2，样品采集后30min内于2-8℃，1000×g离心15min，取上清即可检测。
3组织匀浆/组织全蛋白
用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液，称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中，在冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行反复冻融或超声破碎。最后将匀浆液于2-8℃，5000×g离心5-10min，取上清检测。
其余方法：在分析天平（AL204型）上，称量50-100mg组织样本。在样本中加入5倍质量体积的含1%PMSF的1×PBS缓冲液；并用小剪刀等工具将组织样本剪碎（尽可能小块）。注：1×PBS缓冲液使用前，需加入PMSF，现用现加，PMSF终浓度为1mM。打开超声破碎仪，将超声破碎仪的功率调至25%，超声时间2s，间隔时间5s，总时间2min。放入样本，冰上超声3min。视样本匀浆情况调整总时长。超声完成后，将样本放于4℃或冰上裂解30min。打开离心机，将转速调至12000×g；将样本放入离心机，离心10min，取上清，按需要分装，于-20℃贮存。注：留取20μL样本，用于后续BCA法测定样本蛋白含量。
组织匀浆液或组织全蛋白中的蛋白浓度对于检测实验的影响至关重要，建议样本蛋白浓度至少1mg/mL以上，较低浓度蛋白的组织匀浆液有可能导致ELISA检测失败。
4.细胞提取液
贴壁细胞
用冷的PBS轻轻清洗，然后用胰蛋白酶消化，1000×g离心5min后收集细胞；
可直接离心收集。收集的细胞用冷的PBS洗涤3次。每10
6个细胞中加入150-200μLPBS重悬(推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂；若含量很低可减少PBS的体积)并通过反复冻融或超声使细胞破碎。将提取液于2-8℃，1500×g离心10min，取上清检测。注：留取20μL样本，用于后续BCA测定。
其余方法：
对于
贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。以2百万细胞为例，在样本中加入100μL的含1%PMSF的1×PBS缓冲液，震荡混匀细胞，4℃或冰上裂解30min。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。必要时可以进行超声处理，超声步骤与组织样本相同。
对于
悬浮细胞：离心收集细胞，以2×10
6细胞为例，在样本中加入100μL的含1%PMSF的1×PBS缓冲液，震荡混匀细胞，4℃或冰上裂解30min。用手指轻弹悬浮细胞以充分裂解。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成（5-10）×10
5细胞/管，然后再裂解。必要时可以进行超声处理，超声步骤与组织样本相同。注：1×PBS缓冲液使用前，需加入PMSF，现用现加，PMSF终浓度为1mM。打开离心机，将转速调至12000×g；将样本放入离心机，离心10min，取上清，按需要分装，于-20℃贮存。注：留取20μL样本，用于后续BCA法测定样本蛋白含量。
5.细胞培养上清或其他生物体液
收集液体后于2-8℃，1000×g离心20min，除去杂质及细胞碎片。取上清检测。注：因细胞培养基中的胎牛血清影响或其他生物体液中杂蛋白的影响，不建议进行BCA法测定样本蛋白含量。
实验细节与注意事项
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收集血液应避免产生溶血现象。红细胞破碎，释放大量的过氧化物酶，会影响ELISA检测中的辣根过氧化物酶（HRP）或碱性磷酸酶（AP）的酶促反应，造成检测结果的不确定性。
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样品收集后若在1周内进行检测可保存于2-8℃，若不能及时检测，请按一次使用量分装，冻存于-20℃(1个月内检测)，或-80℃(3个月内检测)，避免反复冻融。在检测前，冷冻过的样本应缓慢地融化并离心除去冻融过程产生的沉淀物。室温混匀后使用。
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试剂盒检测范围不等同于样本中待测物的浓度范围，建议实验前通过相关文献预估样本中待测物的浓度并通过预实验确定样本的实际浓度情况。如果样品中待测物浓度过高或过低，请对样本做适当的稀释或浓缩。
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检测样本的稀释推荐多步稀释法，常规稀释检测为血清/血浆检测稀释度为2倍、20倍、200倍；细胞上清稀释度为5倍、50倍、500倍；建议实验前通过相关文献预估样本中待测物的浓度。
对于稀释倍数比较大的检测样本，参考稀释方案如下：
稀释100倍：一步稀释。取5μL样本到495μL标准品/样本稀释液内，做100倍稀释；
稀释1000倍：两步稀释。取5μL样本到95μL标准品/样本稀释液内，做20倍稀释，再取5μL 20倍稀释样本到245μL标准品/样本稀释液内，做50倍稀释，总共稀释1000倍；
稀释100000倍：三步稀释。取5μL样本到195μL标准品/样本稀释液内，做40倍稀释，再取5μL 40倍稀释样本到245μL标准品/样本稀释液内，做50倍稀释，最后取5μL 2000倍稀释样本到245μL标准品/样本稀释液内，做50倍稀释，总共稀释100000倍；
每步稀释时取液量不少于3μL，稀释倍数不超过100倍。每步稀释都需混合均匀，避免起泡。
05
若所检样本不在说明书所列样本之中，建议做预实验验证其检测有效性。
06
若使用化学裂解液制备组织匀浆或细胞提取液，由于引入某些化学物质会导致ELISA测值出现偏差。
07
某些重组蛋白可能与试剂盒中捕获或检测抗体不匹配而出现不能检测的情况。
08
对于组织匀浆、组织全蛋白、细胞提取液等蛋白提取样本，经BCA法测定样本蛋白含量后，建议进行蛋白浓度的统一化，避免因组织重量、细胞数、产物体积等因素造成的人为误差；例如，统一全部检测样本浓度为1-2mg/mL，进行后续的稀释和检测。
草莓苗的繁殖方式有匍匐茎繁殖、母株分株繁殖、微繁殖、种子繁殖等方式。前3种属于无性繁殖，后代能与亲代保持完全的致性；种子繁殖属于有性繁殖，后代变异程度很大，跟亲本有很大的区别，所以生产上不会利用种子进行秧苗繁殖。
一、匍匐茎繁殖
匍匐茎是草莓的主要繁殖器官，发生匍匐茎的植株叫母株，母株是匍匐茎营养生长的第一个营养供给源，发生匍匐茎的多少与母株的健壮充实程度直接相关。从母株上发生的匍匐茎本来与花序是同源，二者能根据栽培环境条件的变化而相互转化。一般来说，花芽分化和匍匐茎的发生均以日照12h为界，气温以20℃为界，高温发生匍匐茎，低温引起花芽分化。
但是，经过低温时间的长短对匍匐茎的发生数量能起决定性作用，如促成栽培，植株未经过低温处理就覆盖大棚薄膜的匍匐茎发生数量少；露地栽培经过低温时间长，发生匍匐茎的数量就多。绝大多数的草莓品种都有发生匍匐茎的能力，发生匍匐茎的多少与品种特性、母株定植时期、栽培管理条件以及环境条件等因素有关。
利用匍匐茎繁殖秧苗是草莓生产上普遍采用的繁殖方法，方法简单，管理方便，既可利用生产田直接采苗，又可建立专门的育苗圃。但一般应采用专门的育苗圃进行育苗，在专门育苗圃内，每亩一年内可繁殖3万株壮苗。这种方法繁育的秧苗生命力强，生长旺盛，进入结果期早，当年秋天定植，第二年就能开花结果。新形成的匍匐茎苗还可抽生匍匐茎，通常一个母株能发生5~15个匍匐茎，每个匍匐茎可生长3~5个幼苗。这些匍匐茎苗以发生早的、距离母株近的生长旺，质量好，不易染病。
二、母株分株繁殖
母株分株繁殖又称根茎繁殖或分墩繁殖。这种方法适用于两种情况：一是需要更新换地的草莓园，将所有植株全部挖出来，分株后栽植；二是用于某些不易发生匍匐茎的草莓品种。采用母株分株繁殖时，应在果实采收后，及时加强对母株的管理，适时地进行施肥、浇水、除草、松土等工作，促使新茎腋芽发出新茎分枝。
当母株的地上部有一定新叶抽出，地下根系有新根生长时，将母株挖出，剪掉下部黑色的不定根和衰老的根状茎，选择上部1~2年生根状茎逐个分离，这些根状茎上具有5~8片健壮叶片，下部应有4-5条长4cm以上的米黄色、生长旺盛的不定根，分离出的根状茎可直接栽植到生产园中，定植后要及时浇水，加强管理，促进生长，第二年就能正常结果。这种分株的繁殖方法繁殖系数较低，一般3年生的母株，每株只能分出8-14株适宜定植标准的营养苗。这种分株的新茎苗，多带有分离伤口，容易受土传病菌侵染而感病。
但分株繁殖法不需要专门的繁殖田，不需要摘除多余的匍匐茎和在匍匐茎节上压土等工作，可节省劳力和成本。在分株繁殖时，对只有叶片没有须根的根状茎营养苗，可保留1-2片叶，其余叶片全部剪掉，然后进行遮阴扦插育苗，经过精细管理，使其发根长叶后在秋季定植，越冬前能培育成较充实的营养苗。
三、微繁殖
利用微繁殖育苗，近年来在国际上发展很快，我国也已经开始采用。微繁殖是通过组织培养的手段进行繁殖。草莓微繁殖时将草莓茎尖(约0.5mm)接种在培养基上，诱导出幼芽，在试管中通过腋芽萌发增殖，试管苗经过驯化后移栽到育苗圃中。微繁殖最大的优点是可以获得脱毒种苗，其后代生长势旺盛，整齐一致，果实品质优良，增产效果明显。
四、种子繁殖
用种子繁殖的草莓苗，由于成苗率低和性状分离，不能保持原品种的优良特性，所以生产上不采用。但为了杂交育种及选育新品种，为了从远距离引种，为了对某些难于获得营养苗的品种进行遗传基因保留，需要进行种子繁殖。种子繁殖的草莓苗生长旺盛，根系发达，不容易衰老，对不良环境条件适应能力强。一般实生苗经过10~16个月就开始结果。种子繁殖应从优良单株上选择充分成熟的果实，然后将种子取下，摊开晾干，最后将晾干的种子装入袋内保存。
剥取少量草莓种子，可用镊子、小刀或牙签将种子取下，平铺在纸上阴干；或用刀片削下带种子的果皮，平铺在纸上阴干，然后将种子取下，也可将带种子的果皮放入水中，清洗浆液后捞出种子晾干；或者把整个果实包在纱布内揉搓，挤出果汁后再用水清洗，滤出种子，摊开晾干，最后将晾干的种子除去杂质，装入袋内保存。但上述方法比较费工，最简单、安全、快速的取种方法是采用工具法脱粒，就是用高速组织捣碎机或打浆机分离种子，迅速把草莓种子脱粒。
把选好的果实除去果柄，在水中冲洗干净，按果实与水1：1的重量混合，倒入高速组织捣碎机或打浆机的杯中，用慢速搅拌20，静止3-5min后可使种子与捣碎液分离，为了加速捣碎液澄清，可在搅拌前加2%的食盐。采用这种方法脱粒，每千克鲜草莓可获得102-112g种子，脱净率在95%左右，种子不损坏，对发芽无影响，较人工脱粒工作效率可提高8倍以上。在室温条件下草莓种子的发芽力可保持2~3年。草莓种子没有明显的休眠期，可随时播种，一般春播或秋播较好。
为了提高种子的出苗率，播前将种子包在纱布袋内用水浸泡24h，然后放在冰箱内，经0-3℃低温处理15-20天进行播种，发芽率可达70%以上。如果播前对种子进行层积处理1-2个月，也能提高发芽率和整齐度。也可在播种前将种子浸泡12h，种子膨胀后播种效果也不错。在播前不加任何处理的也能出苗，但出苗较晚，出苗率较低且出苗不整齐。草莓种子粒小，适宜播在育苗盆或育苗盘内，盆内装入肥沃、疏松并经过筛的细营养土，如在苗床播种，土壤要平整好，多施腐熟厩肥。播种前先浇透水，水渗后在土面上均匀撒播，然后覆盖0.2~0.3cm厚的细土。
为保持表层土壤湿润，在播种盆上可蒙上塑料薄膜，这样还能增加土温，提早出苗。在20~25℃条件下，播种后15天即可出苗，幼苗生长2~3个月，长出1~2片真叶时进行分苗。可将幼苗栽入装有营养土的小盆或育苗钵中，也可栽入纸袋营养钵，每盆栽一株，摆入育苗床进行精心培育，待苗长到4~5片复叶时，即可带土移栽到大田或育苗圃内，进行进一步培育。一般春播的秋季即可大田定植，秋播的要在第二年春季才能定植，因为幼苗弱小，越冬能力差，冬前定植不易越冬。
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